徐静斐于1929年11月生于江苏省南京市，1948年9月就读于南京金陵女子文理学院外语系，1949年1月参加第二野战军先前独立支队，1949年5月在南京军管会驻安徽大学担任联络员，1950年6月在南京市人民政府文教局担任科员，1951年6月担任芜湖市人民政府秘书处机要员、秘书、副组长。1954年9月至1956年9月在安徽农学院蚕桑系学习。自1956年9月任职于安徽农学院(现安徽农业大学)蚕桑系，历任讲师、副教授、教授、系主任、中国蚕学会副理事长、安徽省蚕学会理事长。1996年6月光荣离休。

徐静斐长期从事遗传育种教学及科研工作，教授过《遗传学》、《蚕体解剖生理》、《专业英语》等课程。她主持的水稻科研项目获农牧渔业部技术进步一等奖和国家科技进步二等奖。1986年获全国总工会颁发的“五一”劳动奖章。她秉承父亲遗志，爱祖国、爱人民，曾把母亲留给她的房产无偿捐给国家，并曾拿出毕生积蓄50万元，成立安徽省徐悲鸿教育基金会，以表彰教书育人先进个人。